讓專(zhuān)業(yè)人員告訴你使用細胞計數板時(shí)一定要注意哪些事
更新時(shí)間：2021-08-03瀏覽：1208次
細胞計數板是一種常用的細胞計數工具，醫學(xué)上常用來(lái)計數紅細胞、白細胞等而得名，也常用于計算一些細菌、真菌、酵母等微生物的數量，是一種常見(jiàn)的生物學(xué)工具。
細胞計數板的注意：
鏡檢計數室。因前一次清洗不到位，或者保存過(guò)程中存在污染，更或者因操作不當導致的計數室存在劃痕，若不及時(shí)清洗或更換，則會(huì )對后期實(shí)驗計數產(chǎn)生極大影響。所以，在每次使用血球計數板之前都需要加一步鏡檢計數室，如若在鏡檢時(shí)發(fā)現計數室有污物，則需按要求清洗并吹干后再進(jìn)行實(shí)驗。
搖勻后取液。在吸出培養液進(jìn)行計數之前，需輕輕震蕩試管，使菌體分布均勻，防止聚沉淀，從而提高計數的代表性和準確性。
先蓋血蓋片后加菌液。在菌懸液搖勻后，應先在血球計數板上蓋上血蓋片，再用滴管吸取少許菌懸液，從計數區中間平臺沿血蓋片的上邊緣滴入一小滴菌懸液，利用液體的表面張力一次性充滿(mǎn)計數區。若先加菌液再覆蓋血蓋片，則容易因為菌液加入過(guò)多，而導致血蓋片未與血球計數板支持柱接觸，血蓋片浮于菌液上方而導致最后計數偏大，同時(shí)會(huì )因為有氣泡產(chǎn)生而導致計數偏小。
靜置片刻再計數。靜置5min，待菌懸液不再漂浮流動(dòng)，酵母菌全部沉降后再將血球計數板放到顯微鏡下進(jìn)行計數。先在低倍鏡下找到需要觀(guān)察計數的大方格及中方格，將中方格移到視野中央，然后撥動(dòng)轉換器移至高倍鏡進(jìn)行計數。
高倍鏡下調亮度。低倍鏡下，用平面鏡和小光圈，可以清晰地看到血球計數板上的酵母菌。但是，撥動(dòng)轉換器換到高倍鏡后，即使是用了平面鏡和最小光圈，視野里往往還是白茫茫一片，什么都看不見(jiàn)，這時(shí)候可以嘗試操作遮光器上的金屬遮光片進(jìn)行遮光處理。因為活的酵母菌和培養液的折光率相近，所以要在高倍鏡下將視野調得暗一些。
掌握計數原則。一般選擇觀(guān)察的菌液濃度控制在每個(gè)小方格內有4或5個(gè)菌體為宜，若其濃度太高，可適當稀釋?zhuān)徊⒉捎?ldquo;計上不計下，計左不計右”的計數原則。
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