學(xué)會(huì )了細胞計數板的這7個(gè)操作步驟你就能熟練的使用它
更新時(shí)間:2021-06-15瀏覽:1480次
細胞計數板是一種常用的細胞計數工具,醫學(xué)上常用來(lái)計數紅細胞、白細胞等而得名,也常用于計算一些細菌、真菌、酵母等微生物的數量,是一種常見(jiàn)的生物學(xué)工具。
細胞計數板使用方法:
1、視待測菌懸液濃度,加無(wú)菌水適當稀釋?zhuān)ㄐ泵嬉话阆♂?00倍),以每小格的菌數可數為度。
2、取潔凈的血球計數板一塊,在計數區上蓋上一塊蓋玻片。
3、將菌懸液搖勻,用滴管吸取少許,從計數板中間平臺兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴(不宜過(guò)多),讓菌懸液利用液體的表面張力充滿(mǎn)計數區,勿使氣泡產(chǎn)生,并用吸水紙吸去溝槽中流出的多余菌懸液。也可以將菌懸液直接滴加在計數區上(不要使計數區兩邊平臺沾上菌懸液,以免加蓋蓋玻片后,造成計數區深度的升高),然后加蓋蓋玻片(勿使產(chǎn)生氣泡)。
4、靜置片刻,使細胞沉降到計數板上,不再隨液體漂移。將血球計數板放置于顯微鏡的載物臺上夾穩,先在低倍鏡下找到計數區后,再轉換高倍鏡觀(guān)察并計數。由于生活細胞的折光率和水的折光率相近,觀(guān)察時(shí)應減弱光照的強度。
5、計數時(shí)若計數區是由16個(gè)中方格組成,按對角線(xiàn)方位,數左上、左下、右上、右下的4個(gè)中方格(即100小格)的菌數。如果是25個(gè)中方格組成的計數區,除數上述四個(gè)中方格外,還需數中央1個(gè)中方格的菌數(即80個(gè)小格)。為了保證計數的準確性,避免重復計數和漏記,在計數時(shí),對沉降在格線(xiàn)上的細胞的統計應有統一的規定。如菌體位于大方格的雙線(xiàn)上,計數時(shí)則數上線(xiàn)不數下線(xiàn),數左線(xiàn)不數右線(xiàn),以減少誤差。即位于本格上線(xiàn)和左線(xiàn)上的細胞計入本格,本格的下線(xiàn)和右線(xiàn)上的細胞按規定計入相應的格中。見(jiàn)右圖:即本格中計數細胞為3個(gè)。
6、對于出芽的酵母菌,芽體達到母細胞大小一半時(shí),即可作為兩個(gè)菌體計算。每個(gè)樣品重復計數2-3次(每次數值不應相差過(guò)大,否則應重新操作),按公式計算出每mL(g)菌懸液所含細胞數量。
7、測數完畢,取下蓋玻片,用水將血球計數板沖洗干凈,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免損壞網(wǎng)格刻度。洗凈后自行晾干或用吹風(fēng)機吹干,放入盒內保存。