細胞計數片是如何使用的?看完下文你就學(xué)會(huì )了
更新時(shí)間:2022-12-06瀏覽:949次
1、根據待測細菌懸浮液的濃度,加入無(wú)菌水進(jìn)行適當稀釋?zhuān)⒂嬎忝總€(gè)細胞的細菌數量。
2、取一個(gè)干凈的血細胞計數板,用蓋玻片蓋住計數區域。
3、搖動(dòng)細菌懸浮液,用滴管吸一點(diǎn),從計數板中間平臺兩側的凹槽中沿蓋玻璃的下邊緣滴一小滴,讓細菌懸浮液利用液體的表面張力填充計數區域,不要產(chǎn)生氣泡,并使用吸水紙從凹槽中吸收過(guò)量的細菌懸浮液。細菌懸浮液也可以直接滴到計數區上,然后覆蓋玻璃蓋。
4、讓它靜置一段時(shí)間,這樣細胞就會(huì )沉淀在計數板上,不再隨液體漂移。將血細胞計數板放在顯微鏡臺上并夾緊。首先在低倍顯微鏡下找到計數區域,然后切換到高倍顯微鏡進(jìn)行觀(guān)察和計數。由于活細胞的折射率與水的折射率相似,因此在觀(guān)察過(guò)程中應降低光的強度。
5、計數時(shí),如果計數區域由16個(gè)中間正方形組成,則按照對角線(xiàn)方向在左上、左下、右上和右下的4個(gè)中間正方形中計數細菌數量。如果是由25個(gè)中間正方形組成的計數區,除了上述四個(gè)中文邊外,還需要計算中心一個(gè)中間正方形的細菌數量。為了確保計數的準確性,避免重復計數和遺漏,計數期間應對網(wǎng)格線(xiàn)上沉降的細胞的統計有統一的規定。
6、對于芽接酵母,當芽達到母細胞的一半大小時(shí),可以算作兩個(gè)細胞。對每個(gè)樣品重復計數2-3次,并根據公式計算每毫升(g)細菌懸浮液的細胞數。
7、測量后,取下蓋玻片,用水清洗血細胞計數板。不要用硬物清洗或擦拭,以免損壞格柵秤。洗完后,自己或用吹風(fēng)機擦干,然后放在盒子里存放。